《选修三》 胚胎工程（理论基础：胚胎学理论）

1．防止多精子受精的机制（屏障）：①透明带反应 → ②卵黄膜封闭作用

2．卵子受精的标志是：→ 在卵黄膜与透明带的间隙中观察到两个极体

3．受精完成的标志是：→雌、雄原核融合。

4. 受精作用的意义或作用：使受精卵成为二倍性细胞、确定性别、启动受精卵发育。

5. 哺乳动物胚胎发育过程：

受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚→胚层分化与组织器官形成→胎儿

  ①早期胚胎发育过程包括：卵裂期、桑椹胚、囊胚、原肠胚。

②卵裂期和桑椹胚阶段的特点：→细胞在透明带内进行有丝分裂，细胞数目增加，

但胚胎体积不增加或略减小；细胞体积变小，每个细胞的遗传物质含量不变。

   ③桑椹胚为实心胚，细胞数最多有32个，未发生细胞分化，每个细胞都有全能性。

   ④囊胚：是胚胎时期开始进行细胞分化的阶段。具有两个胚层和1个囊腔。

⑤原肠胚：具有内、中、外三个胚层和原肠腔，细胞分化能力最高。

6.体外受精与早期胚胎培养

   ①卵母细胞采集方法：◆超数排卵后冲取卵母细胞、 ◆屠宰场采集、

                 ◆借助超声波探测仪、内窥镜从活体动物卵巢中吸取。

②精子采集方法：◆假阴道法（牛、羊）、◆手握法（猪）、◆电刺激法

③精子的体外获能方法：◆培养法（兔、猪等）、  ◆化学诱导法（牛、羊等）

   ④体外受精方法：将获能精子与成熟卵子同放在获能溶液或专用受精溶液中培养。

   ⑤早期胚胎培养：将受精卵放在胚胎培养液中培养至桑椹胚或囊胚阶段。

    ⑥早期胚胎的冷冻保存方法：→放在－196℃的液氮中保存。

7.设计试管动物与试管动物相比，需要对胚胎进行设计（包括：性别、遗传特性的设计）

8.胚胎移植（可充分发挥优秀母畜的繁殖潜力，也可解决人类生育难题）

  ●基本步骤：

①选择遗传特性和生产性能优秀的雌雄个体供卵或供精，受体要健康和繁殖机能正常。

    ②对供体母畜和受体母畜注射促性腺激素进行同期发情处理。

③再用促性腺激素处理供体母畜进行超数排卵处理。

④用优秀同种公畜进行配种或用其精液进行人工授精。

    ⑤（牛）配种7天后，用冲卵法获取早期胚胎（桑椹胚或囊胚）。

⑥对胚胎进行质量检查，选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。并采用DNA探

针法鉴定胚胎性别；采用手术法和非手术法将胚胎移入同物种的受体母畜子宫中。

    ⑦移植后要对受体母畜进行妊娠检查。

   ●胚胎移植的生理学基础：

①经同期发情处理后的受体母畜处于与供体母畜相同的生殖生理状态， 所以，

受体母畜子宫不排斥外来胚胎（成功原因）

      ②早期胚胎呈：游离状态，为胚胎收集提供可能

9.胚胎分割移植技术：→是获得多个相同（基因型）遗传性状个体的途径。

●基本步骤与注意事项：

①选择发育良好的，形态正常的桑椹胚或囊胚进行胚胎分割。

②分割前应采用DNA鉴定方法对滋养层细胞进行胚胎性别鉴定。

③用分割针或分割刀在实体显微镜和显微仪下对胚胎进行分割。

④对囊胚分割时，必须均等分割内细胞团，否则会影响胚胎的恢复和发育。

 ⑤应将分割出的一半裸囊胚注入到空透明带内或直接给受体。

 ⑥分割的份数不宜过多，因为操作难度越大，移植的成功率越低。

10.胚胎干细胞（ES或EK细胞）是从早期胚胎（桑椹胚或囊胚内细胞团）或 原始性腺

（胎儿性腺）中分离出来的一类细胞。①形态结构特点：体积小，细胞核大，核仁明显。

  ②功能特点：具有发育的全能性，体外培养时能保持未分化状态而不分化。